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柱前衍生及柱后衍生法

更新时间:2024-01-04      点击次数:847
 关于检测要领?

GB 5009.240-2023 食物清静国家标准 食物中伏马菌素的测定 (将于2024年3月实验)

LS/T 6130-2017 粮油磨练 粮食中伏马毒素B1、B2的测定 超高效液相色谱法

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IAC-107伏马毒素免疫亲和柱能够特异性的纯化与浓缩样品中的伏马毒素B1 、B2 、B3 . 伏马毒素免疫亲和柱普遍地应用于粮食、食物、饲料、等样品的提取,该要领速率快、操作简朴、准确性高,瞄准确迅速的测定样品中的伏马毒素起到主要的作用。
? 操作流程?

一、样品前处置惩罚

1.样品提取及稀释

1.1 称取25.0g(准确到0.1g)过筛样品于均质杯中,加入乙腈水(5+5) 100mL,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取20min,定量滤纸过滤。 
1.2 移取2.0mI滤液加入48mL0.1%的吐温/PBS稀释混匀。

2.样品净化
2.1将免疫亲和柱毗连于玻璃注射器下准确移取50.0mL上述样品溶液注入玻璃注射器中。

2.2将空气压力泵与玻璃注射器毗连,调理压力使溶液以约1滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中。

2.3用10mL水淋洗亲和柱流速为1滴/s~2滴/s.直至空气进入亲和柱中,弃去所有流出液,抽干小柱。

2.4准确加入3mL甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脱流速约为1滴/s,网络洗脱液。50°C下氮气浓缩吹干后,用乙腈水 (5+5) 定容至1 mL,待检测。

二、液相条件及衍生要领

柱前衍生法

色谱柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)

流动相: 甲醇:0.1MNaH2PO4(77: 23 体积比)用磷酸将PH值调到3.3

检测器: 引发波长335nm 发射波长440nm

进样体积: 20uL

衍生要领:取100uL标准溶液或样品净化液于进样瓶中加入100uL OPA衍生试剂A涡旋混淆30s,在 2分钟内进样剖析。

柱后衍生法

色谱柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)

流动相: 甲醇/(65+35)

检测器:引发波长335nm发射波长440mm

进样体积: 20uL

衍生泵流速: 0.4mL/min

衍生温度: 50℃

衍生泵流动相: OPA行生试剂B 
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